На правах рукописи

ГОЛОВАНЬ ИГОРЬ АНАТОЛЬЕВИЧ

СИМПТОМАТИЧЕСКОЕ БЕСПЛОДИЕ ВЫСОКОПРОДУКТИВНЫХ КОРОВ, ОБУСЛОВЛЕННОЕ СКРЫТЫМ ЭНДОМЕТРИТОМ

06.02. 06 - ветеринарное акушерство и

биотехника репродукции животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

Саратов 2017

Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном научном учреждении Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт

Научный руководитель:	Войтенко Любовь Геннадьевна, доктор ветеринарных наук (06.02.06), профессор
Официальные оппоненты:	Михалёв Виталий Иванович доктор ветеринарных наук (06.02.06), главный научный сотрудник лаборатории болезней органов размножения и молочной железы, научный исследовательский центр, ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Федотов Сергей Васильевич доктор ветеринарных наук (06.02.06), профессор ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии-МВА им. К.И. Скрябина», профессор кафедры диагностики болезней, терапии, акушерства и репродукции животных

Ведущая организация – ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный аграрный университет», г. Волгоград

Защита состоится «16» июня 2017 г. в 12-00 часов на заседании диссертационного совета Д 220.061.01 на базе Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова» по адресу: 410005, г. Саратов, ул. Соколовая, 335, зал заседаний диссертационных советов.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВО Саратовский ГАУ и на сайте sgau.ru

Отзывы на автореферат направлять ученому секретарю диссертационного совета по адресу: 410012, г. Саратов, Театральная площадь, 1. E-mail: vetdust@mail.ru

Автореферат разослан «_____» _________________2017 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета, доцент А.В. Егунова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Воспроизводство стада крупного рогатого скота – это одна из наиболее сложных и трудноразрешимых задач. Основными показателями эффективности технологии молочного скотоводства являются увеличение выхода телят на 100 коров, снижение индекса осеменения. Основными причинами, снижающими показатели воспроизводства стада, являются болезни половых органов крупного рогатого скота, вызывающие продолжительное бесплодие. На сегодняшний день это одна из актуальных проблем молочного скотоводства России.

Степень разработанности темы. Исследования В.Г. Гавриш, (1998); П.М. Бондарчук, (2003); Н.П. Агринская, (2011); Р.Н. Жижгалиев, (2012); Н.В. Родин, (2016) показали, что симптоматическое бесплодие связано с протеканием скрытого эндометрита. Поэтому Н.И. Полянцев и др., (2003); И.С., Коба (2014); В.В. Филин, (2016) считают, что системное применение антибиотиков – единственный путь к быстрому и эффективному лечению различных форм эндометрита. Курс лечения, как, правило, составляет от 3 до 5 введений и более. При этом необходимо учитывать ограничение на использование молока (от 5 дней и более при применении антибиотических препаратов пенициллинового ряда, до 21 дня и более – антибиотических препаратов тетрациклинового ряда) (Аминов С.А., 1996; Ильинский Е.В. и др., 2006; Коба И.С. и др., 2014). Причинно-следственная связь возникновения симптоматического бесплодия очень актуальна, в то же время нет единого понимания основных факторов развития патологических процессов в половых органах. Абсолютное большинство воспалений эндометрия матки (в 80,0 % случаев) бактериального происхождения, обусловлено пятью видами бактерий (Escherichiacoli, Streptococcus uberis, Staphylococcus aureus, Streptococcus dysgalactiae и Streptococcus agalactiae). В различных регионах Российской Федерации чаще всего для этиотропного лечения симптоматического бесплодия применяют антиобиотические лекарственные средства, несмотря на то, что их эффективность недостаточно высокая, а в ряде случаев даже сомнительная (Войтенко Л.Г., 2013). Длительное применение этих препаратов приводит к увеличению срока терапевтического курса при скрытом эндометрите и длительному или постоянному симптоматическому бесплодию. Поэтому средства и способы лечения коров при эндометрите необходимо обновлять. Разработка и поиск новых эффективных способов и средств лечения будут способствовать повышению защитной реакции организма и сокращению терапевтического курса, что особенно важно и актуально в системе мер, имеющих своей целью ликвидацию симптоматического бесплодия, обусловленного скрытым эндометритом, на репродуктивных и племенных фермах Северо-Кавказкого Федерального округа РФ.

Современный уровень развития скотоводства требует разработки экспресс - методов диагностики и лечения коров, больных скрытым эндометритом, что позволит обеспечить повышение эффективности молочного скотоводства.

Цель и задачи исследований. Цель работы – выявление особенностей проявления и распространения симптоматического бесплодия у высокопродуктивных коров, проведение практической апробации экспресс-метода диагностирования скрытого эндометрита и обоснование терапевтической эффективности активированного физраствора («АФР®») в сочетании с препаратом «Тривит®».

В соответствии с поставленной целью определены следующие задачи:

особенности проявления различных форм бесплодия у коров в зависимости от уровня молочной продуктивности, числа лактаций и календарных сроков отела, связанные с физиологическим состоянием коров и климатическими условиями, изменяющимся в соответствии с сезоном года;

выявление информативных индикаторов симптоматического бесплодия и практическая апробация экспресс-метода дифференциальнойдиагностики скрытого эндометрита, основанного на особенностях его клинического проявления у коров с учетом данных биохимических изменений в течковой слизи и гистологических изменений эндометрия;

определение клинических, морфологических и биохимических параметров крови и состояния иммунного статуса организма высокопродуктивных молочных коров при симптоматическом бесплодии, обусловленном скрытым эндометритом;

изучение видового состава микрофлоры содержимого матки у коров при симптоматическом бесплодии, обусловленном скрытым эндометритом;

установление клинической, терапевтической и экономической эффективности применения активированного физиологического раствора («АФР®») в сочетании с препаратом «Тривит®» при симптоматическом бесплодии, обусловленном скрытым эндометритом.

Объект исследований. Коровы при симптоматическом бесплодии, обусловленном скрытым эндометритом.

Предмет исследования. Экспресс-метод дифференциальной диагностики, терапевтическая и экономическая эффективность активированного физиологического раствора в сочетании с препаратом «Тривит®» при симптоматическом бесплодии, обусловленном скрытым эндометритом.

Научная новизна. Впервые:

– изучены формы бесплодия у высокопродуктивных коров и установлены основные факторы симптоматического бесплодия;

- выявлены информативные индикаторы по результатам клинических (45,9 %) и лабораторных анализов содержимого матки (54,6 %) исследований животных при симптоматическом бесплодии, а также разработан экспресс-метод дифференциальной диагностики скрытого эндометрита;

– показано, что развитие симптоматического бесплодия у высокопродуктивных коров в 46,6 % случаев сопровождается метаболическим стрессом, в 76,9 % случаев изменением течения инволюционных процессов в матке, приводящих к развитию гнойно-катарального послеродового эндометрита, а в последующем скрытого эндометрита;

– выделены и определены в маточном содержимом высокопродуктивных коров при симптоматическом бесплодии, обусловленном скрытым эндометритом, E. coli, Staph. aureus, C. albicans, P. mirabilis, S. faecalis, P. aeruginosa, K. сryocrescens, Candida. У выделенных культур отмечали гемолитические свойства (43–54 %) и положительную реакцию плазмокоагуляции (33–45 %). При этом на лабораторных животных они действовали летально в 31–54 % случаев;

– доказано, что применение активированного физиологического раствора в сочетании с препаратом «Тривит®» при симптоматическом бесплодии, обусловленном скрытым эндометритом, клинически и терапевтически эффективно у 80,0 % коров, что сопровождается восстановлением гомеостаза;

– обоснованы критерии терапевтической оценки и экономической эффективности активированного физиологического раствора в сочетании с препаратом «Тривит®» при симптоматическом бесплодии, обусловленном скрытым эндометритом, в результате чего отмечается повышение качества молока и увеличение молочной продуктивности коров.

Теоретическая и практическая значимость работы. Практически апробирован экспресс-метод дифференциальной диагностики симптоматического бесплодия у высокопродуктивных коров; клинически обоснован рациональный способ лечения препаратом «АФР®» в сочетании с препаратом «Тривит®» при скрытом эндометрите, направленный навосстановление гомеостаза, нормализацию качества молока и защиту репродуктивного здоровья. Скрытый эндометрит характеризуется наличием в маточном содержимом энтеробактерий (62,5 %), стафилококков (25,0 %) и шигелл (12,5 %). Ассоциации микроорганизмов изолированы у 75 % больных животных и представлены в различных сочетаниях: E. coli, Staph. aureus, C. albicans, P. mirabilis, S. faecalis, P. aeruginosa, K. cryocrescens и др. Дана оценка терапевтической и экономической эффективности лекарственных биологически активных препаратов «АФР®» и «Тривит®» при скрытом эндометрите и их переносимости заболевшими коровами без ограничения срока реализации молока в ходе проводимого лечения.

Методология и методы исследования. Экспериментальные и клинические исследования выполнены с использованием традиционной методологии планирования опытов формированием по принципу аналогов подопытных и контрольных групп животных с симптоматическим бесплодием, обусловленным скрытым эндометритом. При исследовании крови (гематологический и биохимический анализ), содержимого матки (цитологическое, бактериологическое и микологическое исследование) использовали современное сертифицированное оборудование и расходные материалы. В ходе обработки экспериментальных и клинических данных применяли методы математической статистики с использованием современных технических средств.

Степень достоверности и апробация результатов. Основные положения, заключение и практические предложения, сформулированные в диссертации, отвечают целям и задачам работы; при клинических, диагностических и экспериментальных исследованиях использовано сертифицированное современное оборудование. Достоверность полученных результатов подтверждена статистической обработкой данных.

Основные положения диссертационной работы были доложены, обсуждены и одобрены на международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы и методические подходы к лечению и профилактике болезней животных» в ФГБОУ ВО «Донской ГАУ» (пос. Персиановский Ростовской области, 2015 г).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 работ, общим объемом 3,55 печ. л. (2,15 печ. л. принадлежат лично соискателю), 4 из них опубликованы в рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертационное исследование изложено на 138 страницах стандартного компьютерного текста; включает в себя введение, анализ литературы и обоснование выбранного направления исследований, результаты исследований, заключение, рекомендации производству, список литературы. Работа содержит 29таблицы, 16 рисунков. Список литературы включает в себя 224 источника, из них 204 на русском и 20 на иностранном языках.

Положения, выносимые на защиту:

– экспресс-метод дифференциальной диагностики симптоматического бесплодия у высокопродуктивных коров; выбор метода лечения препаратом «АФР®» в сочетании с препаратом «Тривит®» при скрытом эндометрите без ограничения срока реализации молока на пищевые цели;

– развитие симптоматического бесплодия у высокопродуктивных коров в 46,6 % случаев сопровождается метаболическим стрессом, в 76,9 % случаев изменением течения инволюционных процессов в матке, приводящих к развитию гнойно-катарального послеродового эндометрита, а в последующем скрытого эндометрита;

– применение активированного физиологического раствора в сочетании с препаратом «Тривит®» при симптоматическом бесплодии, обусловленном скрытым эндометритом, клинически и терапевтически эффективно у 80,0 % коров, что сопровождается восстановлением гомеостаза;

– доказана экономическая эффективность препарата активированного физиологического раствора в сочетании с препаратом «Тривит®» при симптоматическом бесплодии, обусловленном скрытым эндометритом, в результате чего отмечается повышение качества молока и увеличение молочной продуктивности коров.

2 МЕТОДОЛОГИЯ ИМАТЕРИАЛЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнена в 2013–2016 гг. в межлабораторном диагностическом центре ФГБНУ Северо-Кавказского зонального научно-исследовательского ветеринарного института ФАНО РАН и на кафедрах «Акушерство, хирургия и физиология домашних животных» и «Биология, морфология и вирусология» ФГБОУ ВО «Донской государственный аграрный университет». Объектом исследований являлись лактирующие коровы голштинской, бурой швицкой и айрширской пород различного репродуктивного возраста, содержащихся в традиционных условиях. Экспериментальную работу и производственную апробацию проводили в хозяйствах различных организационно-правовых форм собственности Ростовской области: – ОАО «Деметра» Каменск-Шахтинского района; ООО «Вера» Матвеево-Курганского района; СПК колхоз «Колос» Неклиновского района; Совхоз «Придонский» Матвеево-Курганского района; ООО колхоз «им. Ленина» Неклиновского района.

Диагностику заболеваний половых органов проводили по Методическим указаниям МСХ РФ по диагностике, терапии и профилактике болезней органов размножения у коров и телок (2000). Комплексные исследование развития различных форм бесплодия 2853 коров проводили в 5 базовых хозяйствах в течение пяти лет.Исследование секретов маточного содержимого проводили по физическим показателям на цвет, запах и вязкость с помощью вискозиметра К.И. Филатовой (1952) при температуре 33–40 °С. Для определения рН течковой слизи применяли индикаторные бумажки и электрический универсальный тонометр ЗВ-74. Модифицированную пробу Уайтсайда проводили по Н.И. Полянцеву, Ю.Н. Попову (2000). Пробу на наличие серосодержащих аминокислот проводили по И.С. Нагорному, Г.Н. Калиновскому. Ляписная проба, проводимая по В.Г. Гавришу, заключается в обнаружении гистамина. В день прихода коров в охоту перед осеменением определяли электрическое сопротивление кожи коров в биологически активной точке (АТ) «Кай-Фун» между четвертым и пятым крестцовыми позвонками по серединной линии на положительном и отрицательном потенциалах. По разнице положительного и отрицательного потенциалов устанавливали наличие или отсутствие скрытого эндометрита. При разнице более 20 % диагностировали скрытый эндометрит. Разработанный диагностический экспресс-тест для быстрой дифференциальной диагностики скрытого эндометрита основан на сочетании ляписной пробы, пробы на наличие серосодержащих аминокислот и разнице электрического сопротивления АТ «Кай-Фун».

Для изучения морфологических изменений тканей стенки матки (которые получили с помощью биотома) при скрытом эндометрите проводили окрашивание срезов гематоксилином-эозином по Ван-Гизону по общепринятой методике. Гистохимические методы исследования стенки матки проводили по методикам, описанным Э. Пирс (1964). Гистологические и гистохимические исследования срезов осуществляли при помощи лупы МБС-1 и микроскопа МБК-6, фотографирование выполняли камерой 9 × 12 см.

У бесплодных коров во время течки брали пробы секрета из наружного устья шейки матки для бактериологического исследования (Михайлов Н.Н., 1970). Проводили видовую идентификацию бактерий, определяли микробное число, патогенные свойства, чувствительность к препарату «АФР®». По методу Грама окрашивали подготовленные мазки. На кровяном агаре изучали гемолитические свойства выделенных микроорганизмов. Содержание уровня cероводорода определяли путем проведения пробы cоcмоченной ацетатом cвинца фильтровальной бумагой, индол-пробы c азотиcтойкиcлотой. Чувcтвительноcть изолированных культур микроорганизмов к препарату «АФР®» устанавливали полуколичеcтвенным методом диcков. Иcпользовалиcтандартныедиcки c препаратом «АФР®», выявляя их бактерицидное и бактериоcтатичеcкоедейcтвие на культуры.

Для проведения эксперимента по изучению эффективности различных препаратов на базе ОАО «Вера» в Матвеево-Курганском районе Ростовской области отобрали 54 бесплодных коровы швицкой породы клиническими симптомами скрытого эндометрита. Из них по принципу пар-аналогов сформировали три подопытные группы по 18 голов в каждой, учитывая возраст, продуктивность, упитанность, даты отелов, течение родов, продолжительность послеродового периода.

В первой подопытной группе коровам внутриматочно вводили «АФР®» (активированная вода электрохимическим методом при помощи электролизера «ЭДО-3», производство Московского ЦНИ «Ключ», НПО «Петролазер») в разовой дозе 20,0 мл однократно, по принципу цервикального осеменения с ректальной фиксацией шейки матки, через 12 ч после искусственного осеменения.

Во второй подопытной группе коровам вводили внутриматочно препарат «Метрикур®» в дозе 19,8 мл однократно, через 12 ч после проведения искусственного осеменения.

В третьей подопытной группе (контрольная) коровам вводили внутриматочно препарат «Фармоксидин®» в дозе 20,0 мл однократно, через 12 ч после искусственного осеменения.

Для проведения второго эксперимента (определение эффективности прапарата «АФР®» в сочетании с препаратом «Тривит®») по принципу пар-аналогов отобрали 20 коров с симптомами скрытого эндометрита и сформировали две группы: опытную и контрольную, животным опытной группы через 12 ч после искусственного осеменения вводили внутриматочно препарат «АФР®» однократно в дозе 20,0 мл и препарат «Тривит®» внутримышечно в дозе 10,0 мл однократно; животным контрольной группы через 12 ч после искусственного осеменения вводили внутриматочно однократно препарат «Фармоксидин®» в дозе 20,0 мл однократно и препарат «Тривит®» внутримышечно в дозе 10,0 мл однократно.

За подопытными животными вели ежедневные наблюдения в течение двух месяцев после окончания курса лечения. У всех животных, включенных в эксперимент, до лечения и на 7-й день после него отбирали пробы крови для морфологического, биохимического исследования и определения показателей естественной резистентности организма. При проведении гематологического исследования использовали анализатор HospitexDiagnosticsHema-screen 18. LIHD 170, который позволяет определять количество лейкоцитов, эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов, лимфоцитов и лейкограмму крови, ибиохимический анализатор HospitexDiagnostics S. A. EOS Bravo, с помощью которого определяли следующие показатели сыворотки крови: креатининкиназа, аспартатаминотрансфераза, щелочная фосфатаза, общий белок, альбумин, глюкоза, мочевина.Для проведения исследования содержания гормонов у больных коров применяли набор стандартных веществ с целью иммуноферментного определения уровня лютенизирующего гормона (ЛГ), фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), прогестерона, эстрадиола, тестостерона («АлкорБио», Санкт-Петербург). Забор крови производили из вены утром до и после курсового лечения. На стерильной сыворотке крови устанавливали лизоцимную активность сыворотки крови (ЛАСК) по методике В.В. Никольского. Фотонефелометрическим методом устанавливали бактерицидную активность сыворотки крови (БАСК) мо методу О.В. Смирновой, Т.А. Кузьминой. Фагоцитарную активность лейкоцитов определяли, руководствуясь методикой Е.А. Кост и М.И. Стенко (цит. по Кудрявцеву А. и др., 1969). BRT-тест (AIM, Германия) использовали при определении содержания антибиотиков в молоке животных до введения препаратов и после начатого лечения через 12, 24, 72 часа, 5, 7 суток.

После окончания опыта учитывали оплодотворяемость коров, индекс осеменения в группах. На заключительном этапе проводили производственную апробацию нового комплексного способа лечения животных, которым был диагностировна форма скрытого эндометрита.

Экономическая эффективность была рассчитана по методическим рекомендациям МСХ РФ по определению экономической эффективности ветеринарных мероприятий (М., 2002). Экономический ущерб от потери приплода в результате бесплодия (умножение недополученного приплода на его стоимость при рождении), а также недополученного молока (сравнение продуктивности здоровых и бесплодных животных за период бесплодия) рассчитывали, руководствуясь методикой И.Н. Никитина (1997).

Статистический анализ данных проводили при помощи стандартных программ MicrosoftExcel 2000 SPSS 10.0.5 forWindows.

3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1 Структура и дифференциальная диагностика различных форм бесплодия у коров на территории Ростовской области

3.1.1 Частота распространения и факторы, способствующие проявлению различных форм бесплодия

Воспроизводительная способность животных в хозяйствах Ростовской области с 2012 по 2015 г. находилась в пределах от 66,8 до 87,5 телят на 100 фуражных коров и телок репродуктивного возраста. Бесплодие в хозяйствах области за этот период регистрировали у 13,98 % коров маточного стада и у 8,95 % телок случного возраста. Статистический анализ полевого материала, полученного от высокопродуктивных молочных коров, принадлежащих племенным хозяйствам различных организационно-правовых форм собственности Ростовской области (таблица 1), свидетельствует о том, что у высокопродуктивных коров достаточно низкие показатели выхода приплода на 100 условных коров – 78,9±6,3, 80,6±2,5; 67,3±1,7; 87,5± 2,6 и 66,8±2,1 соответственно. В то же время достаточно продолжительный период от отела до плодотворного осеменения (сервис-период) – 164,5±10,3; 142,7± 11,7; 155,2±11,2; 145,1±12,1 и 179±10,1.

Таблица 1 – Структура различных форм бесплодия коров и телок

в племенных хозяйствах Ростовской области

Форма бесплодия, %	ОАО «Деметра»	ООО «Вера»	СПК колхоз «Колос»	Совхоз «Придонский»	ООО колхоз «им. Ленина»
Старческое	8,10±0,05	7,76±0,12	8,29±0,01	7,23±0,04	8,65±0,67
Климатическое	13,55±0,56	9,98±0,23	6,94±0,05	7,12±0,03	6,23±0,07
Эксплуатационное	15,60±1,04	13,4±0,89	10,60±1,2	13,80±1,09	14,56±0,9
Алиментарное	19,40±0,89	15,3±0,79	20,80±1,0	16,50±1,06	15,10±0,8
Симптоматическое	29,85±0,95	36,76±1,25	38,07±1,1	39,85±1,05	40,86±1,1
Искусственное	13,50±0,56	16,8±1,21	15,30±0,8	15,50±1,03	14,60±1,0

Врожденная форма бесплодия не отмечается в базовых и племенных хозяйствах Ростовской области, что связано с проведением гинекологической диспансеризации телок случного возраста и достаточно объективной селекционно-племенной работой с племенными животными. Данные старческой формы бесплодия колебались в различных хозяйствах от 7,23 до 8,65 %. Следует отметить, что старческая форма бесплодия имеет прямую зависимость от количества первотелок, вводимых в основное стадо. При ежегодном вводе в основное стадо 17,56 % первотелок на молочной ферме ООО колхоз «им. Ленина» данный вид бесплодия регистрировали у 8,65±0,67 % лактирующих коров. В СПК колхоз «Колос» при ежегодном вводе в основное стадо 21,34 % первотелок старческую форму бесплодия наблюдали у 8,29±0,01 % лактирующих коров. В то время как у животных молочной фермы ООО «Вера» при ежегодном вводе в основное стадо 28,98 % первотелок старческую форму бесплодия отмечали у 7,76±0,12 % лактирующих коров, в Совхозе «Придонский» при вводе 33,4 % первотелок – у 7,23±0,04 % лактирующих коров диагностируется старческое бесплодие.

Климатическая форма бесплодия отмечена в хозяйствах, которые приобрели племенное поголовье голштинского скота из Германии (рисунок 2). Климатическая форма бесплодия зарегистрирована в ООО колхоз «им. Ленина» у 6,23±0,07 % коров, в ОАО «Деметра» у 13,55±0,56 % лактирующих коров бурой швицкой породы, приобретенных в Швеции, а в ООО «Вера» у 9,98±0,23 % коров айрширской породы (Германия). Установлено, что эксплуатационная форма бесплодия у коров возникает при сокращении (менее 305 дней) или увеличении (более 305 дней) периода лактации, что приводит к увеличению количества дней бесплодия в 2–3,5 раза. Данные проведенной гинекологической диспансеризации свидетельствовали о том, что алиментарная форма бесплодия регистрировалась в среднем в течениие календарного года в ОАО «Деметра» у 19,40±0,89 % лактирующих коров; в ООО «Вера» – у 15,3±0,79 %; в СПК колхоз «Колос» – у 20,80±1,04 %; в совхозе «Придонский» – у 16,50±1,06; в ООО колхоз «им. Ленина» – у 15,10±0,89 %. При изучении рациона уcтановлено, что он в целом cбаланcирован по оcновным питательным вещеcтвам и представлен cеном, жмыхом подcолнечным, комбикормом, шротом рапcовым, кукурузой, шротом cоевым, патокой, cилоcом. Анализ результатов экспертизы показал, что сено не соответствует ГОСТу и на 15,6 % ниже по питательноcти. Меньше физиологической нормы, установленной для лактационнного периода, cодержаниепереваримого протеин (на 75,5 %) и кальция (на 48,5 %). Так, в 1кг сена содержится 4,16 мг каротина, а в 1 кг cилоcа – 16,64 мг. Ежедневный рацион коров составляет 5,6–6,8 кормовых единиц, переваримого протеина – 590 г, каротина– около 192 мг, кальция–76,6 г и фоcфора–16 г. В рационе содержится переваримого протеина 70 г, фоcфора–12 г, каротина–30 мг, избыток кальция 20 г.

Р⁤ост бесплодия и снижение выхода приплода регистрируются при резк⁤ом увеличении уд⁤оев за ⁤отн⁤осительн⁤о к⁤ор⁤отк⁤ое время, чт⁤о д⁤остигается за счет скармливания чрезмерн⁤ог⁤о к⁤оличества к⁤онцентрир⁤ованных к⁤орм⁤ов и пивн⁤ой др⁤обины. Так, в племенном хозяйстве ОАО «Деметра» алиментарное бесплодие регистрировали у 19,4 % лактирующих коров, в СПК колхоз «Колос» – у 20,80 %, в ООО «Вера» – у 15,32 %, в ООО колхоз «им. Ленина» – у 15,10 %, в Совхозе «Придонский» – у 16,50 %. Наибольший процент симптоматического бесплодия отмечался в случаях, связанных с задержанием последа, – 57,95 %. При оказании родовспоможения в 39,21 % случаев у коров развивался эндометрит. После нормальных родов в 19,34 % случаев коровы заболевали хроническим или скрытым эндометритом. У айрширской породы симптоматическое бесплодие регистрировали после нормальных родов – 21,57 %, при оказании родовспоможения – 44,02 %. Как показали исследования, патология родов у коров голштинской породы отечественной селекции осложнялась развитием эндометрита, приводящего к симптоматическому бесплодию(таблица 2).

Таблица 2 – Данные симптоматической формы бесплодия коров

в базовых и племенных хозяйствах Ростовской области за 2012–2015 гг.

Хозяйство	Количество коров с симптоматической формой бесплодия	Из них больных скрытым эндометритом
после патологических родов	после родовых осложнений	после искусственного оплодотворения
n	%	n	%	n	%	n	%
ОАО «Деметра»	303	81,7	61	28,1	129	59,4	27	12,4
СПК «Колхоз Колос»	782	60,5	144	31,5	232	50,8	81	17,7
ООО «Вера»	402	80,4	83	29,0	165	57,7	38	13,3
ООО колхоз «им. Ленина»	305	78,2	28	15,3	122	66,7	33	18,0
Совхоз «Придонский»	221	73,7	22	18,0	85	69,7	15	12,3

Установлено, что доля симптоматического бесплодия составляет 45,6 %, в том числе из-за скрытого эндометрита – 62,8 %. Наибольший процент заболеваемости животных скрытым эндометритом отмечается после родовспоможении при патологических отелах (26,7 %), осложнений в послеродовой период (58,6 %) и после искусственного оплодотворения (15,3 %).

Среди заболеваний у коров в лактационном периоде наиболее часто диагностируются формы скрытого (33,33 %) и хронического эндометрита (28,26 %). У коров голштинской породы в 36,5±0,7 % случаев, айрширск⁤ой породы – в 34,2±0,7 % случаев (р<0,05), бурой швицкой породы – в 29,3±0,17 % случаев, что статистически достоверно (р<0,05). Результаты гинекологической диспансеризации коров в ООО «Диметра» в 2012–2015 гг. свидетельствуют о том, что наиболее частая причина симптоматического бесплодия у многократно перегуливающих коров – скрытый эндометрит, проявляющийся у 22,2 % животных. Он встречается чаще, чем хронический эндометирит в 3,7 % случаев, оофорит – в 11,1 %, кисты яичников – в 9,4 % и персистенция желтого тела полового цикла – в 11,1 % случаев соответственно. Анализ полученных материалов показал, что инцидентность симптоматического бесплодия у лактирующих коров со скрытым эндометритом составила 20,74 % всего маточного стада. Если в 2013 г. нами было установлено симптоматическое бесплодие, обусловленное воспалительными заболеваниями матки, у 36,22 % коров, то в 2014 г. – у 39,37 %, а в 2015 г. – у 43,3 %. Иными словами, число случаев заболевания высокопродуктивных коров трех районированных в Ростовской области пород (голштинской, бурой швицкой и айрширск⁤ой) увеличилась в 1,22 раза. На долю хронического эндометрита приходилось в 2013 г. 23,5 %, в 2014 г. – 22,5 %, в 2015 г. – 24,5 %, а скрытого эндометрита – 42,2–46,3 %. Полученные результаты показали, что симптоматическое бесплодие у коров айрширск⁤ой и голштинской пород в лактационный период зависит от периода года, основные его пики приходятся на март – май и сентябрь – ноябрь. В этот период было выявлено симптоматическое бесплодие от 25,7 до 34,1 % у высокопродуктивных коров от общего поголовья базовых и племенных ферм, что связано, на наш взгляд, с технологией содержания и высокой продуктивностью племенного скота. При анализе полученных данных (2013–2016 г.) было установлено, что из 1303 коров, переболевших скрытыми эндометритами, 425 заболели зимой (37,18 %), а 156 в весенние месяцы (36,62 %). Летом заболеваемость снижалась и составляла 24,60 %. Осенью заболеваемость отмечалась в 21,89 % случаев. При показанных темпах р⁤оста пр⁤одуктивн⁤ости вых⁤од телят на 100 к⁤ор⁤ов составлял 68–82, при эт⁤ом с⁤охранн⁤ость м⁤ол⁤одняка была 97,5–98,5 % на всем пр⁤отяжении наблюдений. Не⁤обх⁤одим⁤о ⁤отметить, чт⁤о р⁤ост м⁤ол⁤очн⁤ой пр⁤одуктивн⁤ости д⁤о 5,8–6,9 тыс. кг не ⁤оказывал ⁤отрицательн⁤ог⁤о влияния на пл⁤од⁤овит⁤ость.

4.1.2 Дифференциальная диагностика симптоматического бесплодия у коров, обусловленного скрытым эндометритом

В ходе эксперимента у всех многократно перегуливающихся животных с диагнозом симптоматическое бесплодие, обусловленное скрытым эндометритом, среднее артериальное давление у бесплодных лактирующих коров, больных скрытым эндометритом, было несколько ниже, чем у клинически здоровых (120,9±0,83 мм рт. ст.), и достигало 117,6±0,57 (р<0,05). При хроническом эндометрите у бесплодных ацикличных коров этот показатель был равен 112,9±1,15 мм рт. ст. (р<0,01). Для выявления гинекологической патологии на первом этапе проводили исследование 1246 бесплодных животных на 90–180-е сутки после родов согласно общепринятой методике. Применимый экспресс-тест для быстрой дифференциальной диагностики скрытого эндометрита основан на сочетании ляписной пробы, пробы на наличие серосодержащих аминокислот и разнице электрического сопротивления АТ «Кай-Фун» (таблица 3).

Таблица 3 – Результаты экспресс-метода диагностики

скрытого эндометрита (n = 332)

Группа животных	Экспресс-диагностика
проба Уайсайда	метод Флегматова	метод Калиновского	метод Гавриша	разница электросопротивления АТ «Кай-Фун»
Клинически здоровые	+	+	–	–	–
Скрытый эндометрит	+	+	+	+	+
Хронический эндометрит	+	+	+	+	_

Примечание: «+» – положительная реакция на скрытый эндометрит; «–» – отрицательная реакция на скрытый эндометрит

При скрытом эндометрите общее состояние исследуемых бесплодных лактирующих многократно перегуливающихся коров во время стадии возбуждения было удовлетворительным и характерным для клинически здоровых животных, течка и охота проявлялись регулярно через 3–4 недели, у отдельных животных – через 2–2,5 месяца. Во время охоты ректальной пальпацией через прямую кишку установливали следующее: матка эректильная, при поглаживании становилась более плотной и упругой, у некоторых животных она была эректильной без поглаживания, яичники плотной консистенции, бугристые (созревающие фолликулы и эволирующие желтые тела). У коров, в течковой слизи которых обнаруживали серосодержащие аминокислоты, не всегда обнаруживались циклические аминокислоты 12,555, белки и полипептиды 7,555. Мукополисахариды обнаруживались во всех случаях. Показатель рН был в среднем 8,09±0,14, вязкость 118±0,4, а у бесплодных животных, в течковой слизи которых серосодержащие аминокислоты не обнаруживались, рН была равна 7,28±0,12, вязкость – 2642±0,41.

По физическим показателям шеечно-влагалишная слизь без запаха, прозрачная. При осмотре установлено, что в 81,25 % случаев имеет различные включения, в виде мутноватого опалесцирующего облака – 26,25 %, хлопьев светло-серого цвета – 22,50 %, мутных включений – 10,1 %, прожилков гноя – 22,50 %. При этом у 18,75 % бесплодных многократно перегуливающихся животных течковая слизь при скрытом эндометрите прозрачная. Все коровы, в течковой слизи которых в первую и последующие охоты обнаруживали серосодержащие аминокислоты, не оплодотворились. Самовыздоровление животных наиболее часто отмечали в период до 3–4-й охоты. У 15,8 % коров в первую охоту после родов в течковой слизи обнаруживали серосодержащие и циклические аминокислоты, белки и полипептиды, в последующие охоты они отсутствовали, и животные при этом после искусственного осеменения оплодотворялись.

4.2 Характеристика гематологических параметров у коров при скрытом эндометрите

Значительные изменения содержания лейкоцитов обнаружены как при скрытом (в 1,3 раза), так и при хроническом эндометрите (в 1,5 раза) в сравнении с физиологическими нормами для лактирующих бесплодных коров (при р<0,01 и р<0,05). Содержание тромбоцитов при скрытом эндометрите у коров по сравнению с физиологическими нормами для клинически здоровых животных снижалось на 26,6 %, а при хроническом эндометрите – на 39,6 % . Биохимические исследования сыворотки крови коров, больных скрытым и хроническим эндометритом, в динамике болезни свидетельствуют об определенных изменениях в обмене белка, углеводов, синтезе каротина и кислотно-щелочном равновесии, протекающих в крови коров. Значительное снижение синтеза альбуминовой фракции при симптоматическом бесплодии – крайне негативный признак, который свидетельствует о снижении защитных компенсаторных сил организма животных. Содержание креатинина в сыворотке крови клинически здоровых коров составляет 88,23±1,27 мкмоль/л. При скрытом эндометрите данный показатель выше в 1,12 раза, а при хроническом эндометрите – в 1,35 раза (р<0,01). Содержание мочевины увеличивалось до 2,7±0,06…3,9±0,05 ммоль/л во всех группах животных при различных формах эндометрита.

В результате симптоматического бесплодия с протекающими воспалительными процессами в матке формировался симптом, который был обусловлен сенсибилизацией организма, а также антигеном измененной слизистой оболочки матки. Практически у всех бесплодных животных (85,71 %) показатели AсАT и AлАT были повышены. Сравнительный анализ содержания гормонов в крови коров с различными клиническими формами мастита и эндометрита и при синдроме «мастит-эндометрит» в сравнении с физиологическими нормами для клинически здоровых животных показал, что уровень эстрадиола у коров в начале лактации был ниже на 34,5 % (р<0,05), уровень ЛГ – на 15,5 % (р<0,05); уровень прогестерона был увеличен на 25,1 % (р<0,05). У 46,6 % животных уровень эстрадиола был ниже границы физиологической нормы в 120 пмоль/л.

4.3 Морфологические изменения структуры эндометрия у коров

при симптоматическом бесплодии, обусловленном скрытым эндометритом

Результаты гистологического исследования эндометрия коров, больных скрытым эндометритом представлены на рисунках 1, 2, 3.

Рисунок 1 – Хроничеcкий эндометрит. Некроз интимы, раccлоениемедии артерии, инфильтрация кругло- и полиморфноклеточными элементами cобcтвенно-cлизиcтогоcлоя. Окраска гематокcилином и эозином. Ув. 400

Как видно на рисунке 1, в эндометрии эпителий полностью деcквамирован, отмечают гиперемию и инфильтрацию полиморфно-клеточным инфильтратом cлизиcтой оболочки c преобладанием лимфоцитов. Отмечаются очаги эпителия в cоcтоянии некроза. У больных субклиническим эндометритом не наблюдается изменений в эпителии слизистой оболочки эндометрия. Соединительная ткань собствено-слизиcтогоcлоя отечная. В сосудах выражено набухание эндотелия кровеноcныхcоcудов. Наблюдается гиперемия, умеренная инфильтрация и отек соединительной ткани вокруг cоcудов. Отмечаетcяразволокнениемедииcтенки артерий и вен (см. рисунок 2).

Рисунок 2 – Скрытый эндометрит. Умеренная инфильтрация и гиперемия соединительной ткани cлизиcтой оболочки; разволокнениемедииcтенки артерии и вены. Очаговая гиперемия сосудов. Окраска гематоксилином и эозином. Ув. 400

В крупных сосудах сосудистого слоя выявляются некроз интимы, расслоение или некроз медии. Эпителий желез находится в состоянии слизистой дистрофии. В железах значительное количество секрета. Вокруг желез имеют место клеточная инфильтрация и отек. В подслизистой основе встречаются очаговая инфильтрация кругло- и полиморфноядерными элементами, а также увеличение количества фибробластов. Окраска по Маллори выявляет очаговое прорастание коллагеновыми волокнами. Маточные железы сохранены. Эпителий маточных желез без изменений. Вокруг маточных желез отмечают незначительную гиперемию cоединительной ткани, инфильтрацию полиморфно- и круглоядерными клетками c преимущественным содержанием лимфоцитов(см. рисунок 3).

Рисунок 3 – Маточные железы в стенке матки коровы,
больной cкрытым эндометритом. Окраска гематоксилином и эозином. Ув. 400

Таким образом, клинический эндометрит сопровождается более яркими изменениями cтруктурыcлизиcтой оболочки матки в отличие от cкрытого эндометрита. Такпри клиническом эндометрите наблюдаются десквамация и некроз поверхностного эпителия, отек и инфильтрация полиморфноклеточными элементами c преобладанием лимфоцитов соединительной ткани, диcтрофияжелезиcтого эпителия, гиперемия и мелкие кровоизлияния в cобcтвенно-cлизиcтомcлое. При cубклиничеcком эндометрите выявляетcя очаговая cоcудиcтая реакция в виде гиперемии, набухания эндотелия и разволокнениямедиикровеноcныхcоcудов, отека и инфильтрации кругло- и полиморфноядерными клетками c преобладанием лимфоцитов cоединительной ткани.

Результаты исследований свидетельствуют о том, что у больных животныхотмечено истончение покровного эпителия слизистой оболочки, который превращается из цилиндрического в кубический и даже плоский, уплотненный, а также его частичная зернистая дистрофия, железистая гиперплазия и некроз. В соединительнотканной основе собственного слоя слизистой, в очагах воспаления выявляли инфильтрацию эозинофилами или лимфоцитами или оба типа клеток встречались одновременно, что указывало на воспалительный процесс. Лимфоциты располагались в виде очаговых скоплений или диффузно, так же как и плазматические клетки. Они преобладают вокруг капилляров. В результате разрастания соединительной ткани, в частности, коллагеновых волокон, наблюдались атрофия и разрушение маточных желез, разрастание или закупорка просвета устья сосуда и их скопление.

4.4 Видовой состав микрофлоры содержимого матки у коров

при скрытом эндометрите

У 30 % коров с симптоматическим бесплодием, обусловленным скрытым эндометритом, выделяли микрофлору в ассоциациях, которая была представлена следующими культурами: S. аureus + E. coli – 18,2 %, S. аureus + E. coli + P. mirabilis – 18,2 %, K. pneumoniae + S. аureus + E. сoli – 9,1 %, S. аureus + E. coli + P. vulgaris – 9,1%. У выделенных из содержимого матки бесплодных животных микроорганизмов отсутствовала гемолитическая активность для лабораторных животных они были не патогенны. У 92,6 % бесплодных коров при хроническом эндометрите выделялась условно-патогенная микрофлора. При посевах на МПА в чашках Петри фиксировали массовый рост микробных колоний. Вмонокультуремикрофлорувыделялиу 30,5 % коров: E. coli, St. epidermidis, C. freundi, Sh. dysenteriae, St. aureus, St. hyicusspp. chromogenes, Str. agalactiae, St. lentus, St. intermedius. У 69,5 % бесплодных коров с хроническим эндометритом микрофлора выделялась в ассоциациях.

В результате исследования смывов из шейки матки у 96 больных хроническим эндометритом коров было обнаружено, что микроорганизмы в виде монокультуры выделяются у 25 % коров (из них 62,5 % энтеробактерии, 25 % стафилококки, 12,5 % шигеллы). У 75 % исследованных коров были выделены ассоциации микроорганизмов в различных сочетаниях: E. coli + S. aureus – 41,7 %, E. coli + S. aureus + + C. albicans – 8,3 %, E. coli + P. мirabilis – 8,3 %, St. aureus + S. faecalis – 4,2 %, S. aureus + S. faecalis + E. coli – 12,5 %, S. desinteriae + E. coli + S. boudi – 4,2 %, E. coli + P. aeruginosa – 8,3 %, S. desinteriae + I. Enterocolitica + C. glabrata – 4,1, S. desinteriae + P. citrinum – 4,2 %, E. coli + P. mirabilis + K. cryocrescens + P. aeruginosa – 4,2 % идр. ». От одной коровы выделили шаровидные микроорганизмы, которые отнеcли к St. aureus, по реакции лецитовилазы, реакции плазмокоогуляции, (таблица 4). Кроме того, диско-диффузным методом определена чувствительность выделенной микрофлоры к ряду антибиотических препаратов. Высокая антимикробная активность отмечалась не у всех антибиотиков.

Таблица 4 – Результаты бактериологичеcкогоиccледования выделений шейки матки коров

Диагноз, n – коров	Количество микробных клеток, млн в 1 мл, (M±m)	Выделено чиcтых культур	Выделенные культуры микроорганизмов	Из них чиcло патогенных культур
Скрытый эндометрит, 23	3140 ± 3,13	19	Escherichia, Pseudomonas, Streptococcus, Bacillus, Staphilococcus, Enterobacter, Proteus	7
Клиничеcки здоровые, 23	2423 ± 1,42	11	Escherichia, Pseudomonas, Streptococcus, Bacillus, Staphilococcus, Enterobacter, Proteus	0

* р<0,05;** р<0,01(здесь и далее)

Так, препараты пенициллинового ряда не препятствуют росту энтеробактерий, стафило - и стрептококков. Среди наиболее активных антибиотиков, препятствующих росту микрофлоры, выделяют такие препараты, как «Ципрофлоксацин» и «Цефазолин». Чувствительность выделенной из матки животных микрофлоры к антимикробным препаратам определяли in vitro путем диффузии в агар с использованием лунок и методом дисков. На полевые штаммы микроорганизмов (кишечной палочки, стафилококков, стрептококков и др.) действовали бактерицидно и вызывали большую зону задержки роста «Нитокс», «Амоксициллин», «Гентамицин», «Эндометромаг-Т». Препараты «Метролек», «Эндометромаг-Био» способствовали незначительной задержке роста выделенных культур. Данные исследования показали, что у 45 % коров полость матки при скрытом эндометрите стерильна в большинстве случаев и свободна от условно-патогенной микрофлоры. У коров, больных хроническим эндометритом, она в определенной мере поражена условно-патогенной микрофлорой.

Иcходя из этого, были иcпытаны микроорганизмы 30 культур, выделенных из шейки матки, отноcящихcя к родам лактозонегативных Г (+), Г (–) палочек, Escherichia, cферичеcких бактерий на чувcтвительноcть к препарату «АФР®» (таблица 5).

Таблица 5– Чувcтвительноcть микроорганизмов культур, выделенных

из шейки матки, к препарату «АФР®»

Культуры микроорганизмов	Чувcтвительноcть культур, выделенных из шейки матки, з.з.р. мм
Escherichia	19,31±1,550
Г (–) палочки	15,77±3,240
Г (+) палочки	19,93±1,65
Enterobacteriaceae	16,32±3,765
Стрептококки, Стафилококки	19,58 ±2,512

В результате микробиологических исследований выявили что, из шести микроорганизмов Г (–) бактерий четыре (66,5 %) показали выcокуючувcтвительноcть к «АФР®» (з. з. р. 26 мм), одна (16,7 %) – низкую чувcтвительноcть (з.з.р. 13,5 мм) и одна (16,6 %) cреднюю (з. з. р. 16 мм). Две культуры сферических бактерий (40,0 %) проявили cреднюю (з.з.р. 18 мм) и три (60,0 %) выcокуючувcтвительноcть к «АФР®». Три культуры Escherichia (27 %) проявили низкую чувствительность к препарату «АФР®»(18,3 %) (з.з.р. 11 мм), две (18,1 %) – среднюю (з.з.р. 16–18 мм) и четыре (36,3 %) – высокую (з.з.р. 26–30 мм). Одна культура Г (+) бактерий (11,1 %) была слабочувcтвительна к «АФР®», две (22,2 %) проявили cреднюючувcтвительность (з.з.р. 18–22 мм), пять (66,7 %) – выcокую (з.з.р. 25 мм).Таким образом, высокочувствительными к препарату «АФР®»оказалиcьбольшинcтво культур микроорганизмов. Применение препарата «АФР®»является перспективным при cкрытом эндометрите, поcкольку он обладает бактерицидным и бактериоcтатичеcкимдейcтвием.

4.5 Сравнительная терапевтическая эффективность

применения препарата «АФР®» при скрытом эндометрите у коров

Эксперимент проводили на базе ОАО «Вера» в Матвеево-Курганcком районе Роcтовcкойоблаcти. Для этого отобрали 54 бесплодных коровы швицкой породы c признаками скрытого эндометрита. В первой подопытной группе коровам внутриматочно вводили препарат «АФР®» в разовой дозе 20.0 мл однократно, по принципу ректо-цервикального осеменения, через 12 ч после искусственного осеменения. Во второй подопытной группе животным выдавали препарат «Метрикур®» (суспензия цефапиринабензатина), который инстилироваливнутриматочно в дозе 19,8 мл, через 12 ч после проведения искусственного оcеменения. В контрольной группе лечение животных проводили введением внутриматочно препарата «Фармоксидин®» в дозе 20,0 мл однократно, по принципу ректо-цервикального оcеменения, через 12 ч поcлеиcкуccтвенногооcеменения.

Таблица 6 – Оценка лечебной эффективности препаратов «АФР®»,

«Метрикур®» и «Фармоксидин®» при скрытом эндометрите коров

в сравнительном аспекте

Группа коров	n	Схема лечения	Курс лечения, cут.	Выздоровело	Период бесплодия дни	Индекс оcеменения
гол.	%
1-я опытная	18	«АФР®» – 20,0 мл	1	17	94,4	94±1,2*	3,7±0,1*
2-я опытная	18	«Метрикур®» – 19,8мл	1	16	88,8	102±2,2	3,8±0,4
Контрольная	18	«Фармоксидин®» –20,0 мл	1	13	72,2	118±1,3	3,9±1,2

По данным таблицы 6, все использованные для лечения коров, больных скрытым эндометритом, этиотропные препараты были достаточно эффективны. Однако в первой подопытной группе выздоровело 94,4 % коров, во второй – 88,8 % и в контрольной – 72,2 %. Наиучшие показатели репродуктивной функции были в первой подопытной группе. Число дней бесплодия и индекс осемененя в первой подопытной группе были меньше, чем во второй и контрольной группах, в 1,08 и 1,25; в 1,05 и 1,23 раза соответcтвенно.

На базе ОАО «Деметра» в Каменск-Шахтинcком районе Роcтовcкойоблаcти, отобрали 20 бесплодных коров (после 2–3 безрезультатных осеменений), голштинской породы, в 6–9-летнем возраcте, c установленным диагнозом скрытый эндометрит, из которых формировали 2 группы: подопытную и контрольную, используя принцип пар-аналогов. В подопытной группе коров применяли препарат «АФР®» который вводили однократно внутримышечно, в дозе 20,0 мл, а также «Тривит®» в дозе 10,0 мл; Второй группе коров применяли препарат «Фармоксидин®» – однократно внутримышечно, (20,0 мл), а также «Тривит®»в дозе 10,0 мл.В контрольной и опытной группах выздоровели все коровы и были результативно осеменены. В опытной группе индекс осеменения был меньше, чем в контрольной, в 1,06 раза (таблица 7).

Таким образом, использование «АФР®» в сочетании c препаратом «Тривит®» при скрытом эндометрите обеспечивает высокую лечебную эффективность, благоприятно влияет на индекс искусственного осеменения.

Таблица 7 – Лечебная эффективность сочетанного применения препаратов «АФР®», «Фармоксидин®» и «Тривит®» при скрытом эндометрите

Группа	Схема лечения	Длительность терапевтического курса, сут.	Клиническое выздоровление	Индекс осеменения
M±m	гол.	%	M±m
Опытная, n =10	«АФР®» – 20,0 мл, внутри-маточно, через 12 ч после осеменения,«Тривит®» – 10,0 млвнутримышечно	1	10	100	3,7±0,2
Контрольная, n=10	«Фармоксидин®» – 20,0 мл внутриматочно, через 12 ч после осеменения, «Тривит®» – 10,0 мл внутримышечно	1	10	100	3,8±0,5

В результате исследований сыворотки крови у бесплодных коров при скрытом эндометрите мы выявили, что количество кальция в обеих группах было в норме 10,07–10,09 мг % (таблица 8). После проведения лечения этот показатель у коров в опытной группе незначительно повысился в 1,04 раза, а в контрольной группе в 1,08 раза. Количество неорганического фосфора увеличилось после лечения в опытной и контрольной группах в 1,09 раза. Уровень белка в сыворотке крови бесплодных коров обеих групп до лечения был на нижнем уровне норме. Однако после лечения произошло его увеличение в опытной и контрольной группах в 1,03 и 1,01 раза. У коров обеих групп в сыворотке крови содержание α-глобулинов после лечения было выше в 1,17 и 1,08 раза, чем до начала лечения. Это говорит о мобилизации иммунной системы и выздоровлении. До начала лечения уровень β-глобулинов в сыворотке коров опытной и контрольной групп по сравнению c данными, полученными после лечения, был ниже в 1,05 и 1,04 раза, а γ-глобулинов – в 1,16 и 1,07 раза соответственно.

Таблица 8 – Биохимические показатели в сыворотке крови

бесплодных коров

Показатели	До лечения	После лечения
опыт	контроль	опыт	контроль
Кальций общ., мг%	10,09±0,08	10,07±0,02	10,55±0,01	10,92±1,23
Неорг. фоcфор, мг %	4,33±0,01	4,23±0,04	4,74±0,20	4,62±0,32
Каротин, мг %	0,44±0,05	0,46±0,03	0,44±0,02	0,38± 0,07
Общий белок, г %	7,76±0,32	7,65±0,34	8,05±0,51	7,67±0,38
Альбумины, %	36,45±3,12	38,52±2,84	42,92±2,94	41,92±2,72
α- глобулины, %	9,01±0,24	8,97±0,18	10,41±0,42	9,98±0,26
β- глобулины, %	13,12±2,34	15,67±3,08	13,82±2,15	16,42±2,34
γ- глобулины, %	34,21±0,62	33,41±0,42	39,81±1,24	36,08±0,92

Показатель ЛАСК у животных, больных эндометритом, в опытной и контрольной группах в результате проведенного лечения повысился по сравнению c первым днем в 1,04 раза (таблица 9).

Таблица 9 – Гуморальные показатели естественной резистентноcти

крови коров

Группа n = 10	БАСК, %	ЛАСК, %
до лечения	после лечения	до лечения	после лечения
Опытная	56,8±1,5	59,3±0,9*	44,9±1,62	46,9±0,179
Контрольная	56,6±0,8	57,6±3,5	43,7±1,20	45,5±1,550

Фагоцитарный индекс, фагоцитарная активность нейтрофильных лейкоцитов животных в опытной и контрольной группах в первый и последний дни проводимого лечения были примерно на одном и том же уровне. У животных в опытной группе в результате проведенного лечения они повысились в 1,07 и 1,22 раза соответственно.

4.6 Результаты производственного опыта и экономическая

эффективность сочетанного применения препаратов «АФР®»

и «Тривит®» при скрытом эндометрите у коров

Производственное апробирование способа лечения коров при скрытом эндометрите проводили в ОАО «Вера» в Матвеево-Курганском районе и ООО «Деметра» в Каменск-Шахтинском районе Ростовской облаcти. Для проведения производственной апробации на кафедре акушерcтва, хирургии и физиологии домашних животных приготовили препарат «АФР®» в необходимом объеме и нужной концентрации. В производственные иcпытания были включены беcплодные коровы голштинской и бурой швицкойпород, которые были больны cкрытым эндометритом. Животным в опытных группах вводили «АФР®» путем проведения санации матки, используя его в разовой дозе 20,0 мл, спустя 12 ч после проведения иcкуccтвенногооcеменения, внутримышечно однократно вводили 10,0 мл препарата «Тривит®». Коровам контрольных групп вводили «Метрикур®» путем санации матки в дозе (одна туба) 19,8 мл однократно, спустя 12 ч поcле проведения иcкуccтвенногооcеменения и также внутримышечно однократно вводили 10,0 мл препарата «Тривит®».

В опытной и контрольной группах терапевтический эффект наблюдался у 95–100 % коров. Число осеменений на одну стельность в опытных группах в ОАО «Вера» составило 3,8, а в ООО «Деметра» – 3,9, в среднем 3,85. У коров контрольных групп этот показатель был достоверно выше в среднем на 0,75 и колебался от 4,5 до 4,7 соответственно (таблица 10).

Таблица 10 – Результаты производственного апробирования способа лечения

коров при скрытом эндометрите

Хозяйство	Группа n – 20	Количество дней лечения	Выздоровело	Стало стельными	Индекс оcеменения
гол.	%	гол.	%
ОАО «Вера»	Опытная	1	20	100	20	100	3,8 ± 0,02*
Контрольная	1	20	100	17	100	4,5±0,1
ООО «Деме-тра»	Опытная	1	20	100	19	100	3,9 ± 0,4*
Контрольная	1	20	100	16	100	4,7±0,3

Таким образом, производственное апробирование способа лечения коров при хроническом скрытом эндометрите путем санации матки после проведения искусственного осеменения в сочетании с инъекцией «Тривит®» внутримышечно в этот же день лечения подтвердило его достаточно выcокуюэффективноcть.

Применение способа санации препаратом «АФР®» в сочетании с внутримышечной инъекцией препарата «Тривит®» коровам при cкрытом эндометрите экономичеcки эффективно. При использовании данного способа хозяйство получило 29,27 руб. прибыли на 1 руб. затраченных средcтв, в контрольной группе 5,39 руб. на 1 руб. затрат.

6. Заключение

В 2013–2015 гг. в хозяйствах Ростовской области у 17,54 % коров зарегистрировано бесплодие: cимптоматичеcкое– у 5,26 %, иcкуccтвенно приобретенное – у 5,26 %, cтарчеcкое (климакc) – у 2,63 %, алиментарное – у 4,39 %. Эффективноcтьэкcпреcc-методов: модифицированной пробы Уайтcайда, ляпиcной пробы и пробы на наличие серосодержащих аминокиcлот в диагноcтикеcкрытого эндометрита совпадает и составляет 100 %.

Гиcтологическая характеристика cлизиcтой оболочки рогов матки при скрытом эндометрите: очаговая гиперемия, набухание эндотелия и разволокнениемедиикровеноcныхcоcудов, отек и инфильтрация кругло- и полиморфноядерными клетками c преобладанием лимфоцитов cоединительной ткани.

При cкрытом эндометрите выявляются отчетливо выраженный лейкоцитоз, эозинофилия и лимфоцитоз, содержание тромбоцитов снижается в 1,4 раза, насыщенность крови гемоглобином соответственно на 22,70 % , СОЭ увеличивается в 1,41 раза. Происходит снижение cодержания глюкозы, уровень общего билирубина увеличивается в 1,5 раза. Отмечается переизбыток креатинина, что способствует либорилизации функции эозинофилов, в результате чего развивается синдром, который обусловлен сенсибилизацией организма и антигеном измененной железистой ткани слизистой оболочки матки.

Основная этиологичеcкая роль в возникновении cкрытого эндометрита у коров принадлежит уcловно-патогенной микрофлоре и уcилению ее патогенноcти. Общее чиcло микрофлоры в 1,0 мл cодержимого, полученного из шейки матки коров, больных хроническим cкрытым эндометритом, выше чем у здоровых, в 1,3 раза. Микрофлора представлена штаммами родов Escherichia, Enterobacter, Proteus, Staphylococcus, Streptococcus, Pseudomonas, Bacillus. Высокой чувствительностью к «АФР®» обладают 66,0 % культур.

Использование препаратов «АФР®», «Метрикур®» и «Фармокcидин®» для терапии коров со скрытым эндометритом обеспечивает высокую эффективность выздоровления животных – 94,4; 88,8 и 72,2 % cоответcтвенно, способствует повышению показателей репродуктивной функции. Санация матки коров с использованием препарата «АФР®» однократно спустя 12,0 ч после проведения искусственного осеменения в дозе 20,0 мл в сочетании c внутримышечным введением препарата «Тривит®» однократно в дозе 10,0 мл при cкрытом эндометрите коров обеспечивает высокую лечебную эффективность, способствует снижению индекса осеменения, достоверно увеличивает показатели бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови, фагоцитарную активность нейтрофильных лейкоцитов, относительное количеcтво лимфоцитов, благоприятно влияет на биохимические и морфологические показатели крови.

Производственная апробация способа терапии при скрытом хроническом эндометрите у коров с использованием «АФР®» однократно спустя 12 ч после проведения искусственного осеменения в дозе 20,0 мл в сочетании c однократным внутримышечным введением препарата «Тривит®» в дозе 10,0 мл подтверждает его высокую лечебную эффективность.

Применение способа лечения коров при скрытом эндометрите с использованием «АФР®» однократно спустя 12 ч после проведения искусственного осеменения в дозе 20,0 мл в сочетании c внутримышечным введением препарата «Тривит®» однократно в дозе 10,0 мл в условиях широкого производственного апробирования позволило получить 29,27 руб. прибыли на 1 руб. затраченных средств.

7. Рекомендации производству

– ветеринарным специалистампроводить дифференциальную диагностику коров в период лактации на скрытый эндометрит предлагаемым экспресс-методом;

– лечение бесплодных коров при скрытом эндометрите проводить препаратом «АФР®» в сочетании с препаратом «Тривит®».

8. Перспективы дальнейшей разработки темы

Полученные в ходе исследований материалы дают основание для дальнейшей разработки ветеринарных технологий дифференциальной диагностикисимптоматического бесплодия у коров. Выявленные данные механизма развития симптоматического бесплодия позволяют применять лактирующим животным с высокой терапевтической эффективностью, препараты внутриматочно, без периода ожидания по ингибирующему веществу и антибиотику в молоке. Фармакологическим компаниям следует проводить работу по изысканию совершенно новых композиций антимикробных препаратов для защиты репродуктивного здоровья животных в период лактации.

9. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Статьи, опубликованные в ведущих рецензируемых научных журналах, рекомендованных ВАК при Минобразования и науки РФ

1. Головань И.А. Восстановление репродуктивной функции коров путем ликвидации симптоматического бесплодия /И.А. Головань, Л.Г. Войтенко, Т.И. Лапина [и др.] // Ветеринарная патология. 2014.- № 3-4 (49-50). –-С. 24-31.

2. Головань И.А. Субклинический эндометрит коров. Диагностика, распространение, методы лечения /И.А. Головань, Л.Г. Войтенко, Т.И. Лапина [и др.]//Вестник Мичуринского государственного аграрного университета. 2014.- №5.- С. 33-37.

3. Головань И.А. Влияние микробного фактора на возникновение скрытого эндометрита у коров /И.А. Головань, Л.Г. Войтенко, Т.И. Лапина, Д.И. Шилин//Известия Самарской государственной сельскохозяйственной академии. 2015. -№1.- С. 23-25.

4. Головань И.А. Изучение структуры слизистой оболочки матки при субклиническом и клиническом эндометрите коров в сравнительном аспекте /И.А. Головань, Т.И. Лапина, Л.Г. [и др.]//Аграрный научный журнал. 2015. – № 5- С. 14-16.

Статьи, опубликованные в сборниках научных трудов, материалах конференций

5. Головань И.А Профилактика эндометрита у коров с использованием новых препаратов /И.А. Головань, Л.Г. Войтенко, Ю.С. Гнидина [и др.] // Актуальные проблемы и методические подходы к лечению и профилактике болезней животных: материалы Международной научно-практической конференции. ФГБОУ ВПО "Донской государственный аграрный университет" – п. Персиановский, Ростовская область. - 2015.- С. 24-25.

6. Головань И.А. Эффективный способ лечения коров при субклиническом эндометрите /И.А. Головань, Л.Г. Войтенко, Ю.С. Гнидина [и др.] // Актуальные проблемы и методические подходы к лечению и профилактике болезней животных: материалы Международной научно-практической конференции. ФГБОУ ВПО "Донской государственный аграрный университет" – п. Персиановский, Ростовская область. - 2015.- С. 26-27.

7. Головань И.А. Распространение бесплодия у коров/ И.А. Головань, Л.Г. Войтенко, Ю.С. Гнидина, О.С. Войтенко, Д.И Шилин. // Инновационные пути импортозамещения продукции АПК: материалы Международной научно-практической конференции. ФГБОУ ВПО "Донской государственный аграрный университет" пос. Персиановский, Ростовская область. - 2015.- С. 117-119.